SUMO 蛋白酶切對照融合蛋白試劑

SUMO 蛋白酶切對照融合蛋白試劑也稱為UIP蛋白酶，是一種具有較高活性的半胱氨蛋白酶，來源于酵母編碼的MIP1基因，其特異性識別UBL蛋白的三級結構－SUMO（Small Ubiquitin-Like Modifier）。SUMO蛋白酶能夠識別完整的SUMO序列，并依賴正確的蛋白質構象，僅有完整的序列，沒有正確的結構，SUMO酶是不能對目標蛋白進行切割的。因此，該酶是目前切割特異性最的蛋白酶，可在較廣泛的作用溫度和PH范圍（pH7-9）內發揮作用，切割的最佳溫度為30°C。SUMO蛋白酶的識別序列如下，切割位點位于QIGG之后 SDSEVNQEAKPEVKPEVKPETHINLKVSDGSSEIFFKIKKTTPLRRLMEAFAKRQGKEMDSLRFLYDGIRIQADQTPEDLDMEDNDIIEAHREQIGG

本公司生產的SUMO蛋白酶含有雙His標簽，酶切后，可通過Ni-NTA Resin親和純化，很容易地將SUMO去除；雙His標簽保證了，SUMO蛋白酶高親和力的結合Ni-NTA，以最大限度的去除SUMO蛋白酶。該SUMO蛋白酶分子量約26kD。

組分

組分名稱數量

SUMO 蛋白酶(10 U/μl)100 μl

10XSUMO Buffer1 ml

單位定義

在1XSUMO Protease Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.2% Igepal, 1 mM DTT)中，30°C反應1h，剪切>85％的100pmol底物，所需要的酶量定義為一個活性單位。

儲存

SUMO蛋白酶置于-20°C可保存2年。

SUMO 蛋白酶切對照融合蛋白試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應用實例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果，可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。

應用實例2： 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略，在反應結束后，倒置反應管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現出醒目的綠色，陰性表現出橙色，區分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。

應用實例3：A3825-01 紅黃變色反應（肉眼觀察）

以 體外轉錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起

始前，下圖為 65 度反應 30min 后。

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