氨基酸(AA)檢測試劑盒(茚三酮比色法)

氨基酸(Amino acid，AA)是組成蛋白質(zhì)的基本單位，也是蛋白質(zhì)的分解產(chǎn)物。動物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官，

故尿中氨基酸的變化最能反應(yīng)肝、腎的生理狀態(tài)，植物體內(nèi)氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時(shí)期氮代謝變化

、植物對氮素的吸收、運(yùn)輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義。另外，氨基酸還能反映灼傷、傷寒等方面情況。

氨基酸(AA)檢測試劑盒(茚三酮比色法)(Amino Acid Assay kit)檢測原理是在弱酸條件下，氨基酸與茚三酮共熱情況下

能定量的產(chǎn)生藍(lán)紫色的二酮茚胺(又稱Ruhemans紫)，其吸收峰在波長570nm處，在一定范圍內(nèi)顏色深淺(即吸光度)與氨基酸

濃度成正比，該試劑盒主要用于檢測植物組織、血清、尿液、食品、藥品等中的總游離氨基酸含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，

不宜用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考)：

1、取內(nèi)徑為8mm的玻璃試管2支，分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。

2、靜脈采血1ml，立即取下針頭，沿管壁向各試管注入血液0.5ml，立即混勻并啟動秒表計(jì)時(shí)，并置于37℃水浴中。

3、每隔10s輕搖試管一次，觀察管內(nèi)血液流動情況，直至血液凝固。記錄血液凝固所需時(shí)間，即為ACT。

4、取2支試管血液凝固時(shí)間的平均值作為ACT 值。

計(jì)算：參考區(qū)間： (1.77±0.76)min

4、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品，按取丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml):蒸餾水=1：99的比例配制，使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml，如果檢測組織樣品按丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制，使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml。

注意事項(xiàng):

1、實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)盡量新鮮，如取材后不立即使用，應(yīng)存于-20°C.

2、實(shí)驗(yàn)用蒸餾水不能含有二氧化碳，可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水，并蓋緊口。

3、TA滴定液為堿性溶液，有腐蝕性，請小心操作。

4、TA標(biāo)定液容易長菌，宜4℃保存，一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請棄用。

5、果實(shí)中含酸量較少時(shí)可將TA滴定液適當(dāng)稀釋后使用，可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進(jìn)行滴定。

6、TA滴定液含量計(jì)算公式中，V0最好為3次空白測定的平均值。

7、如果所測樣品的濃度過高，應(yīng)用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定，并將稀釋倍數(shù)帶入公式。

8、如果樣品顏色較深，滴定終點(diǎn)不易觀察，應(yīng)采用電位滴定法。

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