氨基酸(AA)檢測試劑盒(茚三酮微板法)

氨基酸(Amino acid，AA)是組成蛋白質的基本單位，也是蛋白質的分解產物。動物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官，

故尿中氨基酸的變化最能反應肝、腎的生理狀態，植物體內氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發育時期氮代謝變化

、植物對氮素的吸收、運輸、同化及營養狀況等有重要意義。另外，氨基酸還能反映灼傷、傷寒等方面情況。

氨基酸(AA)檢測試劑盒(茚三酮微板法)(Amino Acid Assay kit)檢測原理是在弱酸條件下，氨基酸與茚三酮共熱情況下

能定量的產生藍紫色的二酮茚胺(又稱Ruhemans紫)，其吸收峰在波長570nm處，在一定范圍內顏色深淺(即吸光度)與氨基酸

濃度成正比，該試劑盒主要用于檢測植物組織、血清、尿液、食品、藥品等中的總游離氨基酸含量。該試劑盒僅用于科研領域，

不宜用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考)：

1、取內徑為8mm的玻璃試管2支，分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。

2、靜脈采血1ml，立即取下針頭，沿管壁向各試管注入血液0.5ml，立即混勻并啟動秒表計時，并置于37℃水浴中。

3、每隔10s輕搖試管一次，觀察管內血液流動情況，直至血液凝固。記錄血液凝固所需時間，即為ACT。

4、取2支試管血液凝固時間的平均值作為ACT 值。

計算：參考區間： (1.77±0.76)min

4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品，按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1：99的比例配制，使濃度達到60μg/ml，如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制，使濃度達到60μg/ml。

注意事項:

1、實驗材料應盡量新鮮，如取材后不立即使用，應存于-20°C.

2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳，可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水，并蓋緊口。

3、TA滴定液為堿性溶液，有腐蝕性，請小心操作。

4、TA標定液容易長菌，宜4℃保存，一旦發現有絮狀物請棄用。

5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當稀釋后使用，可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進行滴定。

6、TA滴定液含量計算公式中，V0最好為3次空白測定的平均值。

7、如果所測樣品的濃度過高，應用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定，并將稀釋倍數帶入公式。

8、如果樣品顏色較深，滴定終點不易觀察，應采用電位滴定法。

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