MPASMC小鼠肺動脈平滑肌細胞ATCC

細胞名稱：MPASMC小鼠肺動脈平滑肌細胞ATCC

細胞代次：P4

細胞規格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）

細胞凍存：無血清凍存液

細胞傳代：第一次建議1:2

培養條件：

RPMI-1640＋10% FBS＋0.05mM β-巰基乙醇＋1% 雙抗

到貨處理

用75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養瓶外部，觀察細胞生長情況。

1.不要打開培養瓶蓋，將細胞放入 37℃培養箱中靜置 3-4 小時后再做處理，以穩定細胞狀態。

2.通過離心的方式收集細胞，然后將細胞沉淀加入5-8ml的培養基輕輕吹打均勻后移入新的T25培養瓶中培養。

培養時的注意技巧

1.換液前將培養瓶豎在培養箱靜置1小時左右，輕輕吸掉3ml左右培養基，然后加入3ml的新鮮培養基，混勻后放入培養箱中培養。

2.如果細胞密度比較稀，培養基沒有明顯變化，可以加入500ul的FBS混勻后，豎著培養。

3.傳代時，先按照換液步驟處理，吸掉3ml左右培養基后，加入10ml的新鮮培養基，混勻后分2個T25培養瓶培養。

4.培養一周左右可以離心一次，以去除一些死細胞。

5.該細胞比較脆弱，培養過程中不要頻繁拿出來觀察，以免影響細胞的生長。

6.該細胞的生長環境比較敏感，需使用較好的血清培養。

7.建議使用未TC處理的瓶或者皿培養。

注意事項：有些細胞比較特殊，如貼壁不牢，在運輸過程中發生容易細胞脫落，這是正常現象。請將培養瓶所有培養液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養（后期對比培養），沉淀加入消化液1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml培養基終止反應。再離心，棄上清，加1-2ml培養基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的培養基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂細胞培養箱中培養。

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