生化試劑盒和elisa試劑盒的差異

今天來(lái)和大家總結(jié)一下生化試劑盒和elisa試劑盒的差異。最主要的還是兩者的原理問(wèn)題。那么下面我們一起來(lái)看看吧！

一、檢測(cè)原理：

1、ELISA試劑盒檢測(cè)原理

ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯y(tǒng)i 烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法(圖A)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖B)等等。

抗體的特異性產(chǎn)生是由于抗原決定簇決定，抗體產(chǎn)生的過(guò)程也比較復(fù)雜，特別是小分子抗原必須偶聯(lián)到載體蛋白上才能產(chǎn)生抗體。

ELISA測(cè)定結(jié)果的表現(xiàn)形式:

物質(zhì)濃度：?jiǎn)挝恢饕铅蘥/mL。

2、生化試劑盒檢測(cè)原理

生化試劑盒檢測(cè)的本質(zhì)就是某物質(zhì)化學(xué)變化的顯色反應(yīng)，其反應(yīng)過(guò)程可以劃分為四個(gè)區(qū)：延遲區(qū)、等速區(qū)、過(guò)渡區(qū)和平衡區(qū)，以時(shí)間為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)作圖。

延遲區(qū)：無(wú)規(guī)律可尋。

等速區(qū)：對(duì)應(yīng)的是速率法，一般應(yīng)用于酶活力的檢測(cè)。

過(guò)渡區(qū)：對(duì)應(yīng)的是固定時(shí)間法，目的是解決某些化學(xué)反應(yīng)的非特異性問(wèn)題，提高準(zhǔn)確度。

平衡區(qū)：對(duì)應(yīng)的是終點(diǎn)法，主要是測(cè)定某物質(zhì)在樣本中的含量。

目前，我公司的生化試劑盒采用的原理為：可見(jiàn)區(qū)的顯色反應(yīng)和紫外區(qū)的某一物質(zhì)變化量。某物質(zhì)與顯色劑反應(yīng)后，形成區(qū)別于自身的顏色反應(yīng)，在某一波長(zhǎng)下，吸光度的強(qiáng)弱與物質(zhì)的含量呈正比關(guān)系。

生化測(cè)定結(jié)果的表現(xiàn)形式：

① 物質(zhì)濃度：?jiǎn)挝恢饕莔g/L、mmol/L、μmol/mgprot等

② 某種能力和活力：世界上沒(méi)有真實(shí)物質(zhì)存在，以另一真實(shí)存在的物質(zhì)變化量來(lái)表示其能力大小;其單位為U/L、U/gprot等。例如酶活的單位：在特定條件下，每分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)化1 μmol底物的酶量為一個(gè)單位(U)，或者轉(zhuǎn)化1 μmol的有關(guān)基團(tuán)的酶量。

二、從微觀角度來(lái)看

某一物質(zhì)的抗原決定簇的活性位點(diǎn)(或者抗原抗體特異性結(jié)合位點(diǎn))，與化學(xué)反應(yīng)的活性位點(diǎn)可能存在差異。

生化試劑盒和ELISA試劑盒的檢測(cè)結(jié)果趨勢(shì)是正相關(guān)、負(fù)相關(guān)還是不相關(guān)的問(wèn)題，需要更高技術(shù)設(shè)備和方法，以及大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來(lái)驗(yàn)證。從原理中也說(shuō)明了ELISA試劑盒分種屬，而生化試劑盒不分種屬的問(wèn)題。